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「DIFF+」抗狂犬|DIFF-狂犬假病毒中和抗体检测方法

作者:浙江迪福润丝生物科技有限公司 暂无发布时间 (访问量:5405)

中和抗体检测——为狂犬病防控加保险

 

狂犬病毒(Rabies virus,RABV)是高度致命的病毒,主要通过咬伤、抓伤或接触感染的动物唾液传播给人类,且大多由犬只传播。该病毒会攻击中枢神经系统,引发严重的神经症状,导致急性脑脊髓炎。一旦发病,病死率接近100%,目前尚无有效治愈手段,但通过疫苗接种可以有效预防。

 

近些年,狂犬病在发展中国家,尤其是亚洲和非洲部分地区仍然严重。根据世界卫生组织(WHO)的数据,每年约有5.9万人死于狂犬病,约95%的病例发生在亚洲和非洲,印度、中国、菲律宾等国家的流行情况尤为严重。许多国家已经通过推进宠物和流浪动物疫苗接种、提高暴露后预防性疫苗(PEP)覆盖率来控制狂犬病,然而由于疫苗接种者自身免疫等因素的影响,任何疫苗都不能100%确保接种者体内产生足够的保护性抗体,即疫苗接种≠100%有效保护,狂犬疫苗也是如此。即使全程规范接种疫苗,也可能由于自身免疫等个体差异原因仍有免疫失败的风险,接种疫苗后免疫效果评价至关重要。

 

DIFF-狂犬假病毒中和抗体检测方法

 

狂犬病病毒中和抗体检测,具有早检测、早知情、早保护的作用。通过狂犬病病毒中和抗体检测可量化疫苗效果,判断狂犬疫苗接种是否产生中和抗体,中和抗体的滴度是否能达到保护水平,将发病风险降至最低。

 

根据世界卫生组织(WHO)狂犬病专家咨询委员会的信息,狂犬中和抗体水平等余或高于0.5IU/ml时,受种者才具备了有效的保护能力。当前的狂犬中和抗体检测方法通常有小鼠中和实验(MNT)、快速荧光灶抑制试验(RFFIT)、荧光抗体病毒中和试验(FAVN)等,然而除了对生物安全等级的要求较高外,还有许多其他差异(图1)。

图1. 当前的狂犬中和抗体检测方法对比

迪福润丝生物采用的狂犬假病毒中和抗体检测方式通过荧光斑点计数法,只需简单操作,无需染色,可通过假病毒的荧光特性定量检测样本中的中和抗体含量(图2、图3)。检测结果与第三方检测结果高度一致(图4)。

图2. DIFF假病毒狂犬中和抗体检测案例

图3. DIFF假病毒狂犬中和抗体检测案例(中和曲线)

图4. DIFF假病毒狂犬中和抗体检测与第三方结果对比

 

服务与方法优势

 

安全方便

DIFF狂犬假病毒是经过人工编辑后的病毒颗粒,而不是活狂犬病毒进行实验可以显著降低实验的生物安全风险,无需寻求高生物安全等级实验室。

结果直观

假病毒表达GFP,阴阳性区分明显;梯度稀释抗体,无需估算感染面积。

数据可靠

DIFF狂犬假病毒作为复制型的假病毒,可以更真实模拟RABV感染,中和抗体检测结果可完全对标国家标准。

 

关于DIFF-狂犬假病毒

 

DIFF-狂犬假病毒是迪福润丝生物通过对病毒的定向改造,使得其可以表达狂犬病毒保护性抗原G蛋白,同时表达荧光报告基因eGFP(图5)。经研究,DIFF-狂犬假病毒能够感染细胞,还原真病毒感染细胞的过程,是一种用于代替狂犬病毒进行中和抗体检测的优质模型,大大降低狂犬中和抗体检测的生物安全风险。

图5.DIFF-狂犬假病毒构造原理示意图

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