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大鼠小肠平滑肌细胞原代培养

作者:江阴齐氏生物科技有限公司 2014-08-22T15:51 (访问量:2291)

 

1. 组织源:1周龄大鼠
2. 性别:
3. 消毒方法:PBS清洗 5次
4. 培养用液
基础培养基:DMEM (low-glucose)      添加因子:10% FBS;
5. 消化用液
成分:Collagenase-2(2%)、Collagenase-1(2%)
时间:90min
温度:37℃
6. 培养基本操作方法
a. 大鼠表面喷70%酒精消毒,无菌解剖,取肠组织;
b. 无菌PBS清洗6-8次,将肠内表面外翻;
c. 无菌PBS清洗3次,用含双抗的无菌PBS清洗2次;
d. 手术线系住两端,加入10ml酶消化液,37°消化1.5小时;
e. 充分吹打细胞消化液,使肠内表面组织、细胞尽量脱落;
f. 取出鸡肠组织,1000rpm离心5min,弃上清液,加无菌PBS清洗并离心两次;
g. 弃上清,往沉淀中加2ml完全培养基,重悬细胞后接种至6孔板,37°5%CO2培养箱中培养观察。
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